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딸기에서 DNA를 추출하는 이 절차가 작동합니까?

딸기에서 DNA를 추출하는 이 절차가 작동합니까?


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집에서 할 수 있는 딸기에서 DNA를 추출하는 이 실험을 해보고 싶었습니다.

https://www.stevespanglerscience.com/lab/experiments/strawberry-dna/

그러나 약간의 독서를하는 동안 다음 기사를 발견했습니다.

http://www.ncbe.reading.ac.uk/PRACTICALS/PDF/DNA_isolation.pdf

"이 과일[키위 과일, 바나나, 딸기]은 많은 양의 DNA를 생성하는 것처럼 보이지만 실제로 생성되는 물질은 펙틴에 불과합니다."

그들이 옳습니까? 당신이 추출한 것이 실제로 DNA라는 것을 어떻게 말할 수 있습니까?


첫 번째 기사에 설명된 추출 프로토콜은 표준 DNA 추출 프로토콜입니다. 나는 다른 유형의 세포에 대해 실험실에서 이 방법의 변형(일부 개선 포함)을 수천 번은 아니더라도 수백 번 이상 사용했습니다. "딸기" 실험은 시각적으로 흥미롭고 일반적으로 사용 가능한 시약을 사용하기 때문에 특히 중학교 및 고등학교 수준에서 교실 시연에 매우 인기가 있습니다. 이 시약은 실험실 등급은 아니지만 기본적인 DNA 추출에는 충분합니다.

나는 두 번째 기사의 저자가 추출된 물질이 "펙틴보다 조금 더"라고 주장한 이유에 대한 과학적 근거를 생각할 수 없습니다. 그가 데이터를 제공하지 않았거나 데이터에 대한 참조를 제공하지 않았기 때문에 그가 결론의 근거가 무엇인지 알기가 어렵습니다.

알코올 침전 단계(최종 단계) 동안 DNA가 일정량의 세포 단백질을 끌어내리는 것은 확실히 가능합니다. 이것이 실험실 설정에서 DNA를 "정리"하고 공동 침전 단백질을 제거하기 위해 일반적으로 몇 가지 추가 단계를 수행하는 이유입니다. 이는 단백질 오염 물질이 후속 분석을 방해하여 데이터를 신뢰할 수 없게 만들 수 있기 때문에 DNA에 대한 추가 분석을 계획하는 경우 필수적입니다. 한 가지 예외는 단백질-DNA 상호작용을 연구하는 경우이지만 이는 별도의 실험 유형입니다.

나는 이 실험이 대학이나 대학원 수준의 수업이 아닌 초급 수준의 학생들을 위해/에 의해 수행될 것이라고 가정하고 있습니까? 그렇다면 교실 시연을 위해 이러한 추가 정화 단계는 보증되지 않습니다. 시간이 많이 걸리고 보는 것은 매우 지루할 것입니다... 대부분의 연구실 작업이 그러하듯이. :-) 이러한 추가 단계를 수행하더라도 정제된 DNA는 알코올로 다시 침전되는 경우가 많으며 시각적으로 첫 번째 알코올 침전에서 본 것과 유사하지만 약간 덜 불투명합니다. 아마도 대부분의 학생들이 알아차리거나 흥미롭게 여기는 것은 아닐 것입니다.

어느 쪽이든, 딸기 실험이 DNA를 추출하고 있다고 말하는 것은 완전히 정확합니다. DNA에는 세포 단백질이 결합(또는 "고착")할 수 있으며 실험실 환경에서 DNA를 분석하려면 몇 가지 다른 단계를 수행해야 한다고 항상 설명할 수 있습니다. DNA 분석. 이것은 또한 초급 수준의 학생들에게 DNA와 단백질이 서로 상호작용한다는 사실에 대한 소개를 제공할 것입니다.

도움이 되기를 바랍니다!


DNA 추출 - 딸기

딸기는 8배체로 염색체가 8세트 있습니다. 딸기에서 DNA를 추출하는 절차는 간단하고 결과는 일반적으로 명백합니다. 딸기 주스의 분홍색 용액 내에서 흰색 DNA 가닥을 쉽게 볼 수 있습니다.

이 절차에서는 딸기를 부수고 세제와 소금을 첨가하여 세포벽을 분해하여 핵 내에서 DNA를 방출합니다. 그런 다음 이 으깬 딸기의 액체를 비커에 여과합니다. 이 물질을 여액이라고 합니다. 그런 다음 여액을 시험관에 붓고 알코올 층을 그 위에 붓습니다. 그런 다음 DNA는 시험관의 알코올 층으로 침전됩니다.

  • 가정용품을 이용하여 딸기에서 DNA 추출
  • DNA 추출 과정에서 화학물질의 역할 규명
  • DNA의 큰 샘플을 관찰

필요한 재료:

  • DNA 추출 완충액: 탈이온수 1000ml, 깨끗한 접시 세제 50ml, 소금 1티스푼
  • 딸기(다른 과일도 효과가 있음)
  • 지퍼백
  • 커피 필터 및 깔때기
  • 여액을 수집하기 위한 시험관, 비커 또는 컵

1. Ziploc 저장소에 딸기(또는 절반)를 추가합니다.
2. DNA 추출용 완충액 10ml를 넣고 딸기와 완충용액을 1분 정도 으깬다.
3. 깔때기와 커피 필터를 사용하여 딸기 주스를 비커에 걸러냅니다.
4. 여과액을 시험관에 옮기고 시험관을 절반 정도만 채우고 거품이 옮기지 않도록 해야 합니다.
5. 딸기 혼합물 위에 차가운 알코올을 천천히 붓거나 떨어뜨립니다. 딸기 혼합물 위에 단일 레이어를 원합니다.
6. 에탄올 층에 흰색 가닥이 형성됩니다. 교반 막대를 사용하여 가닥을 감습니다.

토론 질문

1. 딸기의 DNA는 어떻게 생겼습니까?

2. 과학자들이 세포에서 DNA를 제거할 수 있는 것이 왜 중요한가요?

3. 추출 과정에서 세제, 에탄올, 소금의 역할은 무엇입니까?

4. 여액과 침전물의 차이점은 무엇입니까?

4. 음식에 DNA가 있습니까? 어떻게 아세요? 왜 다른 유기체의 DNA를 섭취하여 해를 입지(또는 변경)되지 않습니까?

/>이 작업은 Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 국제 라이선스에 따라 사용이 허가되었습니다.


DNA 추출 실험

시험관 내 DNA (사진: Richard Newstead)

머리말
DNA 또는 Deoxyribo DeoxyriboNucleic DNA는 deoxyribonucleic acid의 약자로서 대부분의 생물체에 존재하는 유전 정보 코드 분자입니다. DNA는 염색체를 구성하는 물질이자 생물체에 저장되어 있는 유전정보이기도 하다. 컬렉션에 있는 이 유전 정보는 특정 작업을 수행할 수 있도록 준비된 명령/명령의 모음입니다.

모든 DNA 소스를 사용할 수 있지만 이 실험에서는 녹두, 시금치 잎, 딸기, 닭 간, 바나나와 같은 재료의 DNA 소스를 사용하는 것이 좋습니다. 살고 있는 사람이나 애완동물의 DNA를 사용하지 마십시오.

1,100ml의 DNA 소스
식염 또는 NaCl 2.1ml
3. 찬물 200ml
4. 단백질의 특성을 바꾸는 효소(예: 고기 연화제(파파야 수액), 신선한 파인애플 주스 또는 콘택트 렌즈 세척제)
5. 30ml 식기 세척 세제 액체
6. 알코올 70-90% 또는 이소프로필 알코올 또는 에틸 알코올

재료
1. 믹서
2. 블렌더
3. 체
4. 컵 또는 비커 유리
5. 시험관
6. 빨대 또는 이쑤시개

절차
1. 모든 재료, DNA 소스 100ml, 소금 1ml, 냉수 200ml를 섞는다. 그런 다음 블렌더로 블렌딩하고 15초 이상의 빠른 교반으로 혼합물의 균질한 농도를 얻는 것을 목표로 합니다. 이 폭발 후 세포벽을 분해하고 그 안에 저장된 DNA를 방출합니다.

2. 필터를 통해 액체를 다른 용기에 붓습니다. 이 과정의 목적은 큰 고체 입자를 제거하는 것입니다. 액체가 제거되고 고체가 폐기됩니다.

3. 용액에 세제액 30ml를 넣습니다. 용액을 균일하게 저어주거나 돌립니다. 이 용액을 5-10분 동안 반응시킨 후 다음 단계로 진행합니다.

4. 고기 연화제를 약간 추가하거나 파인애플 주스를 뿌리거나 각 병 또는 튜브에 렌즈 접촉부 뚜껑을 청소하십시오. 효소를 결합하기 위해 부드럽게 저어줍니다. 세게 저으면 DNA가 손상되고 용기에서 보기가 더 어려워집니다.

5. 각 튜브를 기울이고 유리 또는 플라스틱의 양쪽에 알코올을 부어 액체 위에 떠 있는 층을 형성합니다. 알코올은 물보다 밀도가 낮기 때문에 액체에 뜨겠지만 섞일 것이기 때문에 튜브에 붓고 싶지 않습니다. 알코올과 각 샘플 사이의 표면을 조사하면 흰 실의 덩어리가 보일 것입니다. 이것이 DNA다!

6. 나무 꼬치나 짚 꼬치를 사용하여 각 튜브에서 DNA를 수집합니다. 현미경이나 돋보기를 사용하여 DNA를 확인하거나 작은 알코올 용기에 넣어 보관할 수 있습니다.

논의
1. 이 실험의 첫 번째 단계는 많은 양의 DNA를 포함하는 물질을 선택하는 것입니다. 우리는 어디에서나 DNA를 사용할 수 있지만 DNA에 높은 식물의 근원은 실험이 끝날 때 더 많은 제품을 생산할 것입니다. 인간 게놈은 2배체이며, 이는 각 DNA 분자의 두 복사본을 포함한다는 것을 의미합니다. 많은 식물은 유전 물질의 여러 복사본을 포함합니다. 예를 들어, 딸기 팔배체는 각 염색체의 8개 사본을 포함합니다.

2. 블렌딩은 DNA를 다른 분자에서 분리할 수 있도록 세포를 분리/분해하는 과정입니다. 단백질을 제거하는 소금과 세제는 일반적으로 DNA에 결합되어 있습니다. 세제는 또한 샘플에서 지질(지방)을 분리합니다. DNA 절단에 사용되는 효소. 왜 우리는 그것을 자르고 싶어합니까? DNA는 접혀서 단백질을 감싸고 있으므로 분리되기 전에 유리되어야 합니다.

3. 위의 단계를 완료하면 DNA가 다른 세포 구성 요소와 성공적으로 분리되었지만 여전히 보이지 않게 해야 합니다. 여기서 알코올의 기능이 중요한 역할을 합니다. 샘플의 다른 분자는 알코올에 용해되지만 DNA는 용해되지 않습니다. 용액에 알코올(더 좋은 찬물)을 부으면 DNA 분자가 침전되어 DNA를 수집할 수 있습니다.


딸기에서 DNA 추출

덜 익은 것, 덜 익은 것, 과하게 익은 것 중에서 가장 쉽게 DNA를 추출할 수 있는 딸기의 단계를 결정하십시오.

소개:

DNA, 또는 Deoxyribonucleic Acid는 생명의 분자입니다. DNA는 가장 작은 바이러스에서 가장 큰 포유동물에 이르기까지 모든 단일 유기체에 존재하며 스스로 복제할 수 있는 유일한 알려진 분자입니다.

DNA는 머리카락과 같은 긴 섬유질이며 가늘고 길다. 그것은 약간의 비틀림으로 서로 붙어있는 두 가닥으로 만들어졌습니다. DNA는 단백질이 부착되어 DNA를 염색체로 감고, &ldquo유전자를 켜고&ldquo유전자를 끄는&rdquo하는 유전자 스트레치로 구성됩니다.

캘리포니아 딸기, 가족에 속하는 식물의 속 장미과, 그리고 이 식물의 열매. 20개 이상의 명명된 종과 많은 잡종 및 품종이 있지만 상업적으로 재배되는 가장 일반적인 딸기는 정원 딸기 품종입니다. 딸기는 비타민 C를 포함한 항산화제로 가득 찬 영양가 높은 &ldquosuperfood&rdquo로도 알려져 있습니다. 중간 크기의 딸기 8개는 1인분에 45칼로리이며, 비타민 C에 대한 미국 일일 권장량(RDA)의 140%인 210mg을 제공합니다. 칼륨, 거의 3g의 섬유질.

성숙 더 먹을 수 있게 하는 과일의 과정입니다. 인간과 마찬가지로 식물 호르몬은 성장 과정을 조절하는 데 도움이 되는 화합물입니다. 과일은 호르몬이 세포벽을 더 탄력 있고 확장 가능하게 만들면서 자랍니다. 다른 호르몬은 엽록소를 분해하여 밝고 매력적인 색상이 나타나도록 합니다. 호르몬은 주스의 산도를 낮추고 조직의 복합 탄수화물을 더 달콤한 단당으로 전환합니다.

재료:

  1. 보통 크기의 덜 익은 딸기 3개
  2. 보통 크기의 잘 익은 딸기 3개
  3. 평균 크기의 너무 익은 딸기 3개
  4. ½ 수돗물 컵
  5. 작고 투명한 플라스틱 컵 2개
  6. 계량컵 2개-티스푼 1개, 컵 1개
  7. 종이 타월(다른 재료를 말리는 데 사용, 개수가 많을 수 있음)
  8. 주방세제 2티스푼
  9. 소금 2작은술
  10. 1 커피 필터
  11. 소독용 알코올 1/3컵
  12. 나무 아이스 캔디 스틱
  13. 1 비닐 봉투

실험적 절차:

1단계: DNA 추출액 혼합
  1. 플라스틱 컵 1개를 가지고 주방세제 2티스푼을 함께 섞습니다.
  2. 그런 다음 소금 1작은술을 천천히 섞어주세요.
  3. ½컵의 물을 가지고 섞은 후.
2단계: DNA 확보
  1. 딸기 1개를 비닐봉지에 넣고
  2. 큰 덩어리가 없을 때까지 손으로 딸기를 으깨주세요.
  3. DNA 추출액 2큰술 추가
  4. 나무 아이스 캔디 스틱을 사용하여 최소 1분 동안 부드럽게 휘저은 다음 그대로 둡니다.
3단계: 고체에서 액체 분리
  1. 커피 필터를 가지고 사용하지 않는 플라스틱 컵 위에 덮으십시오
  2. 딸기 혼합물을 붓고 30초 동안 또는 액체가 더 이상 떨어지지 않을 때까지 걸러냅니다.
4단계: DNA 추출
  1. 다음으로, 딸기 액체가 있는 것과 같은 양의 차가운 소독용 알코올을 컵의 측면에 붓습니다. 섞거나 휘젓지 마십시오.
  2. 몇 초 안에 딸기 층 위의 최상층에서 백색 탁한 물질(DNA)의 발달을 관찰하십시오.
  3. 컵을 기울여 나무 막대기로 DNA를 집어 계량컵에 담는다.
5단계: 추출 가능한 DNA의 양 측정
6단계: 다른 종류의 딸기로 반복 과정
  1. 모든 플라스틱 컵과 기타 재료를 물로 철저히 헹구고 종이 타월을 사용하여 모든 재료를 건조시켜 오염을 방지합니다.
  2. 다른 유형의 딸기에 대해 이 과정을 반복하여 어떤 것이 DNA를 얻기 위해 가장 추출 가능한지 결정하십시오.

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DNA: 배경 정보

DNA는 무엇을 의미합니까?

DNA는 데옥시리보핵산을 의미합니다.

DNA는 이중 나선 모양의 긴 분자입니다. 두 개의 나선이 서로 꼬여 있습니다. 이 나선은 DNA의 중추이며 당과 인산염으로 구성됩니다. 나선은 사다리의 가로대처럼 나선 사이에 뻗어 있는 염기로 알려진 화학 물질로 연결됩니다. DNA에는 아데닌(A), 티민(T), 구아닌(G), 시토신(C)의 4가지 유형의 염기가 있습니다. A와 T는 G와 C와 마찬가지로 항상 함께 결합됩니다.

DNA는 무엇을 합니까?

우리의 유전자는 DNA로 구성되어 있으며 DNA에는 고유한 유전 암호가 들어 있습니다.
레시피 책이나 레고 설명서처럼 DNA는 우리 몸에서 모든 역할을 하는 모든 단백질을 만들기 위한 지침을 담고 있습니다.

공통 유전자

당신은 파리나 벌레처럼 보이지 않습니다. 그러나 믿거 나 말거나, 당신은 그들 모두와 다른 모든 생물과 유전자를 공유합니다. 과학자들은 인간에 대해 더 많이 배우기 위해 박테리아, 제브라피쉬 및 기타 생물의 유전자를 연구합니다.

당신은 이 생물들과 얼마나 많은 DNA를 공유하고 있습니까?


식기 세척액을 사용하는 이유는 무엇입니까?

식기 세척액이 터지면 딸기의 세포가 열리면서 DNA가 방출됩니다.

우리는 왜 소금을 사용합니까?

그것은 세포의 단백질이 DNA와 분리되어 유지되도록 합니다.

알코올은 무엇을 합니까?

분자가 불용성(용해될 수 없음)일 때 뭉쳐서 눈에 띄게 됩니다. DNA는 알코올에 용해되지 않으므로 DNA 가닥이 뭉쳐서 육안으로 볼 수 있습니다.


양파 DNA 추출 실험

머리말
이 실험에서는 양파를 사용하는데, 이는 양파의 전분 함량이 낮아 DNA가 명확하게 보일 수 있기 때문입니다. 소금은 DNA 포스페이트의 음의 말단을 보호하여 팁이 더 가까이 오도록 하여 DNA가 차가운 알코올 용액에서 침전될 수 있도록 합니다. 세제는 세포에서 지질과 단백질을 용해시키고 세포막을 함께 유지하는 결합을 파괴하여 세포막을 분해합니다. 그런 다음 세제는 지질 및 단백질과 복합체를 형성하여 용액을 침전시킵니다. 양파(알륨 세파)

장비 및 재료
에탄올 95%.
온도계
그릇.
계량컵.
1000mL 베카 유리.
깔때기.
필터
시험관
냉동고
욕조가 있는 핫 플레이트
아이스 큐브.
숟가락
주방용 비누 또는 샴푸
요오드화되거나 요오드화되지 않은 식탁용 소금
증류수
훌륭한 양파
믹서기와 칼로 양파를 자를 수 있습니다.
타이머 또는 시계

3. 최종 부피가 100mL가 되도록 증류수를 비커에 추가합니다. 거품이 생기지 않도록 천천히 저어 소금을 녹입니다.

4. 큰 양파 1개를 칼로 자른 뒤 믹서기에 갈아 1000ml 비커 글라스에 담는다.


6. DNA 용액 1000mL glass를 아래 그림과 같이 55-60°C의 온수 욕조에 10-12분간 투입합니다.

8. 혼합물을 아래 그림과 같이 약 4 ° C의 얼음 수조에서 5 분 동안 냉각시킵니다. 이 과정에서 양파 DNA 혼합물을 숟가락 뒷면으로 유리면에 대고 누릅니다. 이 단계는 DNA 손상을 느리게 합니다.



10. 반응 튜브에 양파 DNA 용액을 약 5 ml 제거합니다. 용액은 다음 단계에서 사용하기 전에 약 하루 동안 냉장고에 보관할 수 있습니다.

11. 냉동실에서 차가운 95% 에탄올 용액을 꺼내어 시험관에 넣어 약 1cm(cm) 이상의 에탄올 층을 만듭니다. 최상의 결과를 얻으려면 에탄올을 가능한 한 차갑게 유지해야 합니다. 용액에 에탄올을 첨가할 수 있습니다.

12. DNA는 에탄올에 용해되지 않습니다. 혼합물에 에탄올을 첨가하면 DNA를 제외한 혼합물의 모든 성분이 용액에 머무르고 DNA는 에탄올 층으로 가라앉습니다. 용액을 2-3분 동안 방치하면 흰색 DNA가 에탄올 층에 침전됩니다.



13. 형성된 DNA는 치아나 피펫으로 채취하거나 휘어진 교반기의 어떤 줄기가 DNA를 채취할 수 있습니까?
  • 여러 다른 시작 물질에서 DNA를 추출하기 위한 지침을 제공하는 일련의 실험 실습입니다. 운동은 6-12 학년 수준을 위해 설계되었습니다.

다음 리소스는 원래 생물 과학 교육을 위한 NSDL(National Science Digital Library) 경로인 BioSciEd Net(BEN) 디지털 리소스 컬렉션을 통해 액세스되었습니다. 더 많은 교육 자료를 보려면 BEN을 방문하여 검색 가능한 데이터베이스를 사용하십시오. BEN은 무료로 사용할 수 있지만 등록이 필요합니다.

    - AccessExcellence의 이 연구실은 과학자들이 사용하는 것과 동일한 기본 도구 및 방법을 사용하여 염색체 DNA를 쉽게 분리함으로써 학생들이 DNA를 구체적으로 다룰 수 있도록 합니다. - 이 Science NetLinks 웹사이트는 DNA 추출 과정을 모델링하여 DNA에 대한 이해를 발전시키는 수업 계획을 제공합니다.
  • [링크 https://web.archive.org/web/20190222033127/http://www.apsnet.org/edcenter/K-12/TeachersGuide/DNA_Easy/Pages/default.aspx 'DNA The Easy Way(및 Gram Stain Without Mess)'] - American Phytopathological Society에서 제작한 이 리소스는 학생들에게 박테리아 세포에서 DNA 분리 절차를 가르치는 짧은 실험실 실습입니다. 또한 학생들은 박테리아 분리물의 그람 염색 반응을 결정하는 방법을 배웁니다. : 이 Access Excellence 리소스는 학생들이 가상 범죄의 가해자를 결정하기 위해 DNA 지문 분석을 사용하는 실험실 활동을 제공합니다. - 이 리소스를 보려면 BEN에 로그인해야 합니다(무료인 BEN에 가입해야 함). 이 PDF 문서는 학생들이 폴리머라제 연쇄 반응을 사용하여 자신의 머리카락에서 DNA 지문을 생성하는 분자 생물학 및 세네틱스의 학부 실험실 실습을 수행하기 위한 프로토콜 및 지침 정보에 대한 자세한 설명서를 제공합니다. 여기에는 학생 개요, 강사 메모 및 실험실 보고서에 대한 제안된 질문이 포함됩니다.

에 대한

재사용

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딸기 DNA 추출

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필요한 재료

  • 커피 필터
  • 피펫
  • 시험관
  • 딸기
  • 주방 비누
  • 소금
  • 플라스틱 지퍼 가방
  • 소독용 알코올


논의

협측 면봉 및 소변에서 얻은 DNA 수율은 면봉 또는 소변 유형, 면봉을 채취하는 개인, 면봉 기법, 면봉 및 소변에 포획된 세포 수에 따라 크게 달라집니다. 6, 11 이 프로토콜을 사용한 예상 수율은 60� ng/μl/swab이고 소변의 경우 25� ng/μl/15 ml 수집(표 1)입니다. 기존 방법과 비교했을 때 2배 더 높습니다. 분리된 DNA의 수율과 순도는 연구원의 처리 절차에 따라 달라집니다. 물질을 추가 처리를 위해 세포 용해 완충액에 즉시 넣지 않았을 때 DNA 품질 및 양의 감소가 관찰되었습니다. 시간지연 처리된 협측 면봉 및 소변 검체에서는 DNA band의 분해가 관찰된 반면 혈액 및 모발 검체에서는 분해가 관찰되지 않는데, 이는 검체의 성질 및 검체 내 뉴클레아제 효소 농도 정도에 기인한 것으로 판단됨 소화 전. 저온 조건에서 3일 동안 보관한 시료에서 어느 정도의 DNA 분해가 있었지만, 본 연구에서는 시료 채취 직후의 협측 세포에서 추출한 DNA PCR 증폭 산물과 협측 세포에서 추출한 DNA PCR 증폭 산물 간에 유의한 차이를 보이지 않았습니다. �ଌ에서 3일 냉동. 또한, 4ଌ 냉장 또는 �ଌ 동결 1주일 보관도 추출된 DNA의 수율이나 DNA의 PCR 증폭에 영향을 미치지 않았습니다. 모발 및 혈액 시료의 경우 모발 시료를 에탄올에 2개월 이상 보관하고 혈액 시료를 EDTA가 코팅된 바이알에 4개월 이상 보관하여도 나중에 사용할 수 있는 고품질의 DNA를 얻을 수 있습니다. �ଌ에서.

일반적으로 DNA 타이핑 연구의 경우 신선한 전혈 또는 혈액으로 염색된 물질이 개인의 DNA '지문'의 1차 출처이며 비교 기준으로 사용됩니다. 여기에 제시된 결과를 통해 협측 면봉과 소변을 DNA 추출을 위한 대체 소스로 사용할 수 있음을 입증할 수 있었습니다. 그러나 대부분의 경우 범죄현장에서 소변을 채취할 때 성별에 대한 정보가 없기 때문에 가용한 DNA의 양에 있어서 남녀의 소변검체에 현저한 차이가 있으며, 10항상 가장 큰 곳에서 채취해야 한다. 사용 가능한 소변 얼룩. 많은 양의 타액과 소변을 통증 없이 비침습적으로 수집할 수 있습니다. 실제로 협측 면봉과 소변은 유아의 경우에도 상세한 분석을 위해 최소한의 소란으로 쉽게 얻을 수 있었습니다. 14 또한 보고된 PCR 분석을 사용하여 병원체의 존재 여부를 연구하기 위해 소변 및 협측 면봉의 DNA에서 바이러스 및 박테리아 유전자를 증폭할 수 있습니다.

모든 샘플에서 분리된 DNA는 표적 미토콘드리아 유전자와 유사한 염기쌍 크기의 PCR 산물을 생성했습니다. 그러나 제한 소화의 경우 모발 및 혈액 PCR 생성물은 우수한 소화 생성물을 생성하였다. 이것은 제한 효소에 의해 제대로 소화되지 않은 소변 및 협측 면봉 샘플보다는 PCR 증폭 산물의 농도가 좋고 불순물이 없는 PCR 샘플의 결과일 수 있습니다. 따라서 PCR-RFLP 기반 분자 분석에 혈액 샘플 대신 모발 샘플을 사용할 수 있습니다.

소변 및 구강 면봉 표본에 존재하는 것보다 훨씬 덜 풍부한 혈청 또는 혈장에서 분리된 DNA에 존재할 수 있는 낮은 수준의 오염 물질이 있을 가능성이 있습니다. 15 이러한 기술은 오염 물질의 양이 적기 때문에 PCR 과정에서 오염 물질이 간섭할 확률이 매우 낮습니다.

Harty et al. 16은 보관으로 인해 DNA 수율이 감소했음에도 불구하고 샘플을 장기간 보관한 후에 PCR 증폭이 성공적이었다고 보고했습니다. 본 연구에서는 �ଌ에 냉동 보관된 모든 샘플에서 분리된 DNA가 나중에 사용하기에 적합했습니다. �ଌ에서 1개월 이상 냉동 보관한 소변 샘플에서 추출한 DNA는 신선한 소변 샘플과 같은 성능을 보였습니다. 소변 검체의 DNA는 시간이 지남에 따라 분해되는 것처럼 보이지만 �ଌ에서 냉동 보관한 소변 검체를 PCR 증폭에 사용할 수 있습니다. 모발 및 혈액에서 분리된 DNA는 추가 분석을 위해 �ଌ에서 동결된 보관용 DNA의 안정성에 기초하여 매우 우수합니다.

결론

협측 면봉, 소변 및 모발에서 성공적인 샘플 수집 및 게놈 DNA 추출은 피험자와 샘플 수집자 모두에게 가시가 있는 침습적 혈액 샘플링에 대한 비침습적이고 신뢰할 수 있는 대안입니다. 17 – 20 여기에서 PCR-RFLP 기반 분석에 충분한 양과 품질의 DNA를 제공하는 비용 효율적이고 쉽고 빠른 샘플 수집 및 DNA 추출의 간단하고 새로운 방법을 시연했습니다. 추출 절차를 비교하면 간단한 페놀-클로로포름 방법이 협측 면봉, 소변, 모발 및 혈액 샘플에서 DNA 추출에 가장 적합한 것으로 나타났습니다. 적절한 보관 조건에서 협측 세포, 소변 및 모발에서 분리된 DNA를 성공적으로 사용하여 PCR 기반 분석을 수행할 수 있습니다. 이 연구에서 개발된 DTT, 고염, 음이온성 세제 용액 mtDNA 추출 방법은 현재 많은 법의학 실험실에서 사용되는 표준 유리 분쇄/유기 용매 추출 기술의 mtDNA 증폭 성공률을 능가하는 빠르고 간단한 프로토콜을 나타냅니다. 이 방법에 사용되는 단계의 수가 상대적으로 적기 때문에 지속 시간이 단축되고 또한 샘플 손실을 최소화하면서 오염 가능성이 크게 감소합니다. DTT 화학 소화 방법은 모든 기본 실험실에서 쉽게 구할 수 있는 시약, 소모품 및 장비를 사용합니다. 그 용이성은 아직 법의학 mtDNA 테스트를 수행하지 않은 실험실의 mtDNA 분석과 모발 샘플을 사용한 인구 기반 연구에 도움이 될 것입니다. 그러나 다른 DNA 추출 방법에서 얻을 수 있는 인간 DNA의 수율과 품질에 관한 중요한 질문이 여전히 남아 있습니다.


비디오 보기: 딸기에서 DNA를 추출하여 먹기 (칠월 2022).


코멘트:

  1. Akub

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